科技成果
成果名称: 针对特定疾病中药新药开发及作用机理研究
成果登记号: 9612019J0167
第一完成单位: 西安交通大学
联 系 人: 仙莹
成果类型: 基础理论
成果体现形式 : 论文
技术领域: 生物、医药和医疗器械
应用行业: 卫生和社会服务业
成果简介:
主要研究内容:
运用巨噬细胞膜模型筛选白毛七中的抗炎活性成分,对其富集、识别鉴定,进行药理活性验证,并进行活性追踪;对活性部位中活性成分的分离、纯化;从整体、组织、细胞和分子水平上探讨白毛七中活性成分的抗炎机制。探索一条新型的进行中药药效物质基础的评价研究的新方法。
研究方法:
1)利用细胞膜色谱技术,筛选白毛七中能与巨噬细胞膜受体结合的活性成分,将白毛七中的效应物质进行分离,使活性成分的分离和筛选结合在一起,以评价药物的作用。
2)结合药理药效学试验,采用急性炎症模型进行体内抗炎作用实验,对所筛选的活性部位进行验证,确定活性部位。
3)采用气相/液相-质谱联用技术鉴定阳性药、白毛七活性部位、巨噬细胞膜色谱筛选模型的保留组分,确定样品中活性成分。
4)应用细胞及分子生物学技术,考察白毛七中活性成分对巨噬细胞的炎性介质,对一氧化氮合成酶基因表达水平及NF-κB核转位的影响,NF-κB与DNA结合活性等系列指标,探讨白毛七中的活性成分的抗炎机制。
达到的主要指标:
1)采用小鼠腹腔巨噬细胞模型,以白毛七不同极性提取物对LPS诱导巨噬细胞中NO和TNF-α产量的影响为考察指标,对白毛七抗炎活性部位进行了筛选。实验结果表明,白毛七乙酸乙酯提取物为其抗炎活性最强的部位。
2)采用建立的PM/CMC-HPLC/MS二维在线联用系统,对白毛七乙酸乙酯提取物中抗炎活性成分进行了筛选。实验结果表明,异嗪皮啶为白毛七的抗炎活性成分之一。
3)建立动物急性炎症模型,对异嗪皮啶的抗炎作用进行初步验证,异嗪皮啶具有良好的抗炎镇痛作用。
4)建立LPS诱发的小鼠内毒素休克模型,对异嗪皮啶预防保护内毒素休克小鼠的作用进行了研究,表明异嗪皮啶对内毒素休克小鼠有很好的预防保护作用。
5)采用小鼠腹腔巨噬细胞模型,对异嗪皮啶调控MAPK通路的作用进行了初步探讨,表明异嗪皮啶抗炎作用机制与MAPK通路相关。
本研究完成后,在重要学术刊物上发表学术论文4篇。培养研究生2名。