针对现有固定化功能蛋白质介质表面蛋白质键合容量低和取向杂乱不一的问题，以组氨酸标签融合蛋白血管紧张素II受体I型受体（Angiotensin II receptor type I，AT1）为例，采用原子转移自由基聚合反应制备聚合物刷修饰的色谱单体；进一步将聚合物刷中的高密度羟基修饰为螯合镍离子或重氮盐，通过两类活性反应基与受体结构中的组氨酸标签发生特异性反应，制备受体色谱固定相。以洛沙坦等5种配体为工具药，研究固定化AT1的保留活性及药物-受体作用规律，对中药葛根提取物进行筛选，建立高效心血管药物活性成分筛选方法。该研究能为其他蛋白质固定化方法提供新思路，对药物活性成分高效筛选具有重要的理论和实际意义。

本研究的特色之处：

建立了高容量His 标签功能蛋白质定向固定化色谱固定相的制备方法针对目前利用亲和色谱法研究功能蛋白质与配体相互作用过程中，功能蛋白质在固定相上键合率低的问题，设计了聚合物刷的固定相基质。通过重氮盐反应和金属镍离子螯合的两种方法定向固定His 标签融合功能蛋白质，建立高容量His 标签功能蛋白质定向固定化色谱固定相制备方法。与传统的随意固定化方法相比，该定向固定化方法可使蛋白质在固定相表面取向和构象统一，显著减少活性位点损失；与传统的定向固定化方法相比，聚合物刷的基质可显著提高蛋白质的固载量，对高效筛选复杂体系中的药物活性成分意义重大。