科技成果

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成果名称: 大鲵繁育及虹彩病毒新型高效疫苗研制关键技术及应用研究

成果登记号: 9612020Y0343

第一完成单位: 陕西省水产研究所

联 系 人: 问思恩

成果类型: 应用技术

成果体现形式 : 新技术

技术领域: 农业

应用行业: 农、林、牧、渔业

成果简介:

本项目针对我省大鲵养殖业中存在的人工繁育技术水平较低、繁育效果不理想以及病毒性疾病难控、难防的技术瓶颈,历经近3年的研究,在大鲵人工繁育技术、大鲵虹彩病毒免疫学检测方法以及新型疫苗研制技术和应用研究等方面取得了突破性进展,取得了较为丰硕的理论研究和实践应用成果,对于促进我省乃至全国大鲵养殖业的持续、健康发展具有重大作用。

比较分析了全人工、仿生态和原生态等3种大鲵人工繁育模式的优缺点,将亲鲵的仿生态培育和人工繁育技术相结合,创新出仿生态+人工繁育的大鲵繁育模式。以接近大鲵繁殖生物学习性的方式培育亲鲵,使得亲鲵具有良好的繁殖能力,通过人工助产保证了卵子的受精率,同时提高了参繁率,参繁率最高达到71.6%;前期自然孵化和后期人工控制下的孵化提高了受精卵的孵化率和成活率,孵化率和成活率最高分别为89%和82.6%,从而使大鲵人工繁育的平均出苗数得到显著提高,最高达到305尾/亲鲵。项目实施期间,全人工、仿生态和仿生态+人工3种繁育模式2015年和2016年总计繁殖大鲵幼苗60843尾和75796尾,其中利用仿生态+人工模式繁育大鲵幼苗分别为27941尾和35450尾。

利用原核表达系统表达的大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白(MCP)为免疫原制备了兔抗MCP多克隆抗体和鼠抗MCP单克隆抗体,建立了检测CGSIV的间接免疫荧光法,具有高灵敏度和较强特异性,可实现CGSIV的快速筛查。筛选的以黄芪、板蓝根和金银花等为主的复方中草药可以显著增强大鲵的免疫功能和抗病毒能力。

利用杆状病毒表达系统表达并纯化了大鲵虹彩病毒MCP蛋白,经检测证实该蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。以纯化的MCP蛋白为包被抗原,建立了CGSIV抗体的间接ELISA方法,具有良好的灵敏度和重复性,为CGSIV感染的大规模筛查和疫苗免疫效果评价提供了可靠技术手段。

以该蛋白为免疫原制备的亚单位疫苗能够为大鲵抵抗CGSIV提供足够的免疫保护力,其免疫保护率达到84.0%。项目组在汉中、安康、商洛等市县的大鲵养殖场进行了新型疫苗的免疫应用试验与推广,共免疫种鲵10000尾,商品鲵35000尾,一年多的应用试验结果显示,疫苗的平均免疫保护率达到80%以上;接种新型疫苗的养殖场大鲵虹彩病毒的发病率降低了30%以上,产生了较为显著的经济效益。