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成果名称: 针刺调控SIRT3介导线粒体保护作用改善AD小鼠学习记忆的机制研究

成果登记号: 9612023J0156

第一完成单位: 陕西中医药大学

联 系 人: 王曼

成果类型: 基础理论

成果体现形式 : 其他

应用行业: 卫生和社会工作

学科分类: 中西医结合医学(360.30)

完成人: 刘奇,邢文文,李璐,张兆星,赵丽娟,李倩,史晓燕,吴涛,王曼,赵杨

成果简介:

通过本项目研究发现,针刺可以显著提升SAMP8小鼠海马SIRT3蛋白表达,提升其调控因子PGC-1α、GATA-2,改善小鼠学习记忆能力,并使用SIRT3特异性阻断剂3-TYP进行了验证。通过本项目的研究,基本证实了去乙酰化酶SIRT3是针刺促突触可塑性发挥改善学习记忆能力的靶点之一,对于阐释针灸改善学习记忆机制具有一定的学术价值。

本研究中,运用RT-PCRmRNA进行检测,数据采用2-△△Ct值作为其基因相对表达水平。模型组SIRT3PGC-1αmRNA的相对含量表达较空白组明显增加(P0.01, P0.05),与模型组相比,治疗组两种mRNA表达均明显下调(P0.01,P0.05)。依据大部分文献,WB的实验结果是符合其他研究的,PCR也应该变化一致。但本研究结果完全相反,可能原因有:1.SIRT3PGC-1α的转录、翻译、合成等过程受到其他因素的影响,干扰了本研究的结果。有研究表明蛋白质的整体表达模式相似于mRNA的表达,但也存在蛋白与基因表达的不一致性,肺癌中观察到mRNA的差异表达(上或下)最多可以捕获40%的蛋白质表达变异,存在不协调蛋白与mRNA的表达。mRNA和蛋白质之间的不一致表达与蛋白质丰度水平、蛋白质亚型等有关。蛋白质的亚型与mRNA的表达相关、也可能不相关。蛋白质丰度水平与mRNA的含量成正相关。质谱法、二维电泳法、微阵列已成为蛋白丰度检测的重要方法,在稳定状态的时候,mRNA的水平决定了蛋白质的水平。蛋白合成的途径包括:转录、翻译、蛋白质的半衰期、蛋白质的合成、蛋白的转运等方面。且强调转录后调控(翻译后修饰)在细胞发育或扰动中的重要性,mRNA前体hnRNA的剪接和加工、mRNA由细胞核转至细胞质的过程及定位、mRNA的稳定性及其降解过程等多环节进行的调控,还有RNA编辑、RNA干扰等现象也属于转录后调控。这可能是一个实验研究中基因检测的重要问题,需要检测蛋白丰度来综合分析蛋白质和mRNA的相关性。2.PCR的样品可能在实验过程中某个环节出现了降解或污染,但4组结果均呈现出差异变化,可能性不大。课题组计划再对mRNA在进行一次重复实验