科技成果

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成果名称: 山羊源大肠杆菌噬菌体及其鸡尾酒制剂的筛选与功能研究

成果登记号: 9612024J0036

第一完成单位: 榆林学院

联 系 人: 常利娜

成果类型: 基础理论

成果体现形式 : 论文

应用行业: 农、林、牧、渔业

学科分类: 家畜微生物学(230.1050)

应用状态: 小批量或小范围应用

完成人: 李陇平,李托,敬晓琪,朱海鲸,史雷,宋晓越

成果简介:

   陕北白绒山羊舍饲圈养强化育肥条件下容易产生氧化应激导致羔羊亚健康、容易感染细菌病、生产效率低等问题日益突显,其潜在生产能力未能充分发挥,大量使用抗生素造成药物残留和环境污染等问题,严重影响养殖效益和生态环境,成为制约陕北白绒山羊产业高质量可持续发展的难题。项目团队针对陕北白绒山羊羔羊断奶前后容易感染大肠杆菌病的难题,开展了陕北白绒山羊羔羊噬菌体生物防治技术体系的研究与集成示范。主要研究内容包括:(1)致羔羊腹泻大肠杆菌分离鉴定、药敏试验和分子分型研究与示范;(2)陕北白绒山羊源大肠杆菌特异性噬菌体分离鉴定、生物学特性研究;(3创制陕北白绒山羊源噬菌体及其鸡尾酒混合生物制剂产品。主要结果如下:(1通过采集腹泻羔羊组织样品,利用常规生物化学方法细菌选择性培养基分离培养、形态鉴定、生化试验和分子生物学方法16S rRNA基因扩增及构建系统进化树对导致羔羊腹泻的大肠杆菌进行分离鉴定,并确定了分离菌株的血清型O119O24为主抗生素耐药谱多重耐药)、致病性小鼠8 h内发病死亡MLST分子分型(ST6126),明确了导致陕北白绒山羊断奶公羔腹泻的主要大肠杆菌流行菌株;(2)利用双层平板培养法和spot test方法分离、鉴定、纯化和浓缩陕北白绒山羊源大肠杆菌特异性噬菌体,确定噬菌体效价(1.19×1012PFU/mL)、最佳感染复数(MOI0.0001)、一步生长曲线(潜伏期15 min,裂解期195 min,裂解量93)、主要蛋白(6个结构蛋白),噬菌体对环境(温度、pH和紫外线)耐受性等生物学特性;小鼠大肠杆菌感染前和感染后分别使用噬菌体PTK进行预防和治疗的试验结果表明,未使用噬菌体PTK的阳性对照组小鼠全部死亡,预防组和治疗组小鼠存活率分别达到80%60%