脂联素（Adiponectin）是一个唯一由脂肪组织分泌的细胞因子，在人体内具有多种功能。本项目利用基因工程技术手段，首先将人脂联素基因的编码序列连接至毕赤酵母分泌型表达载体中，构建得到融合表达载体，然后通过转化大肠杆菌DH5α将其大量扩增，再用电击法转化至毕赤酵母菌株GS115中。得到的大量重组子经过营养缺陷培养（MD）、G418、PCR、Western杂交等筛选和鉴定后，得到目的菌株。最后，通过对目的菌株的发酵培养和亲和层析技术分离纯化得到脂联素蛋白并测定其表达量。   取得成果：   （1）通过PCR反应得到了His-ADPN融合基因，然后将其连接至载体pPIC9k，得到融合表达载体pPIC9k-His-ADPN并验证正确。   （2）通过转化大肠杆菌DH5α，对融合表达载体进行大量克隆和鉴定，结果显示融合表达载体pPIC9k-His-ADPN准确无误，其中脂联素基因的测定序列和NCBI数据库中人脂联素基因序列完全一致，同源性为100%。   （3）转化毕赤酵母完毕后，大量转化子在MD营养缺陷性培养基的筛选作用下孵育后，对得到的单菌落逐步进行G418抗性梯度筛选和鉴定。然后，再对菌株进行SDS-PAGE检测。   （4）挑取较优的菌株进行发酵诱导培养，通过亲和层析技术分别对其发酵液进行收集纯化并浓缩。最终得到脂联素表达量大于0.5mg/L的酵母工程菌株3株，其中最高的一株表达量可以达到1.09mg/L。