多环芳烃(PAHs)是一类广泛分布于环境中的含有两个以上苯环的有机污染物，具有毒性、生物蓄积性和致癌性，并能在环境中持久存在；尤其是高分子量的多环芳烃(HMW-PAHs)，具有较强的疏水性，因此很难通过传统的物理化学方法进行彻底降解。利用微生物降解法消除污染环境中的PAHs化合物，是一种高效、环保、经济的方法。   本项目在获得一株能以萘、菲、荧蒽等多环芳烃为唯一碳源和能源生长的铜绿假单胞菌DN001且该菌株对荧蒽有较强的降解能力（在14天内对500mg/L初始浓度的荧蒽降解率为93.2%）的基础上，通过转座突变技术构建了含有18000多个克隆的随机转座突变体库，从全基因组水平系统筛选和定位了与荧蒽降解的相关基因，获得了16株不能以荧蒽为单一能源和碳源生长的转座突变体；通过随机PCR实验，定位了13个发生突变的基因；尤其是hisA、hisD1、leuC1、purD及AXYL_00207基因的转座突变体，基本生长与野生型相比没有明显变化，但是对荧蒽降解的中间产物水杨酸和龙胆酸的利用能力降低，暗示这些基因可能是与荧蒽降解直接相关的基因。目前还在通过重复实验进一步复筛，以期获得更多与高分子量多环芳烃降解相关的基因。   与此同时，本项目利用SDS-PAGE和2-DE方法检测了菌株DN001在荧蒽诱导下细胞全蛋白的表达变化，并对差异极其显著的蛋白点进行了质谱分析和鉴定，已确定了8个蛋白质点的氨基酸序列，其中诱导后新表达的蛋白有5个，诱导后表达量显著提高的蛋白有3个。利用鉴定出的蛋白同源序列设计简并引物，在该菌株中扩增出了2个蛋白的编码基因，序列比对结果显示，分别与PseudomonasaeruginosaPA7中的亮氨酸-异亮氨酸-缬氨酸-苏氨酸-丙氨酸结合蛋白2（LIVTA-BP2）和类铁蛋白结构域结合蛋白（ferritin-likedomain-containingprotein）的编码基因有94%和88%的同源性，进一步验证了该菌株中确实存在与荧蒽降解密切相关的同源基因，它们的编码蛋白在荧蒽降解过程中起着非常重要的作用，为进一步阐明该菌株的荧蒽降解代谢机理提供了研究基础。