一、课题来源与背景: 本项目为自选课题。B族链球菌（group B streptococcus,GBS）又称为无乳链球菌，是b溶血性链球菌的一种，为条件致病菌，常寄生于人胃肠道和泌尿生殖道，有文献报道称，正常健康成人携带GBS为20%~40%。孕妇感染GBS的危害远远高于非孕人群。近年来的研究发现，妊娠妇女的GBS感染率为10%~30%，是导致产妇和新生儿感染的重要致病菌。研究证实GBS的定植存在地域性,目前尚未见汉中地区GBS感染情况的报道。因此，研究调查汉中地区B族链球菌在妊娠妇女中的感染情况就显得尤为重要。笔者通过对本医院450例妊娠期妇女感染GBS情况及GBS耐药率进行分析研究，为产时抗生素预防治疗提供依据，减少新生儿败血症的产生。

二、技术原理及性能指标：实时荧光定量PCR技术于1996年由美国ABI公司推出，它是一种在PCR反应中加入荧光集团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA模板的定量，而且具有灵敏度高，特异性和可靠性更强，能实现多重反应，自动化程度高，无污染性，具实时性和准确性等特点，目前已广泛用于分子生物学研究和医学研究等领域。B族链球菌检测试剂盒利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,针对B族链球菌基因组特异且无高频SNP位点的序列区域cAMP因子,设计出特异性引物和探针,配以全封闭PCR体系,检测标本中的B族链球菌DNA。B族链球菌检测试剂盒适用于妊娠 34-37 周孕妇生殖道分泌物及直肠分泌物样本中的 B 族链球菌（GBS）DNA 的定性检测，可用于临床 B 族链球菌感染的辅助诊断。

细菌培养法 检 测: 将 阴 道 拭 子、直 肠 拭 子 分 别 接 种 于 血 平板、巧克力平板及 GBS增菌液,37 ℃、0.5% CO2条件下培养24~48h。挑取单个菌落,分纯 培 养 后 采 用 CAMP实 验 进 行GBS鉴定,阳性标本再次分纯培养后,采用分析仪进行进一步鉴定,确认为 GBS后,采用纸片扩散法进行药敏实验,结果判断标准参照美国临床和实验室标准化协会相关文件。

纳入标准：选择我院2016年3月~12月接受产前检查及分娩的孕妇450例，均为单胎妊娠，无不良孕育史，妊娠期间未接受抗菌药物治疗；年龄在27~40岁之间，平均为34岁，孕周在35~37周，平均为35周。每位孕妇同时采集阴道拭子及直肠拭子，同时进行分子生物学实时荧光定量PCR法和微生物学细菌培养法进行GBS检测。

排除标准：溶血标本，保妇康栓，皮炎平使用史的孕妇。

统计分析：采用SPSS21.0软件进行数据处理和统计学分析。计数资料以例数和百分率表示，组间比较采用卡方检验。P<0.05为比较差异有统计学意义。

三、技术的创造性与先进性：3.1首次对汉中地区孕妇感染GBS情况进行了研究。

3.2首次对汉中地区孕妇感染的GBS耐药率进行了研究。

3.3 通过分子生物学实时荧光定量PCR法和微生物学细菌培养法两种方法对汉中地区孕妇感染GBS情况进行了研究。

四、技术的成熟程度，适用范围和安全性：该技术将分子生物学实时荧光定量PCR技术和微生物学细菌培养法同时运用于孕妇GBS的检测中，临床提供准确的药敏实验结果，已达国内先进水平。对于35~37孕周的孕妇推荐进行GBS筛查。

五、应用情况及存在的问题：研究显示，新生儿体表带菌率与母体带菌率相似。但带菌率由于人种不同，采样的部位不同而不尽相同，在一些特殊人群如肥胖，糖耐量异常，多次妊娠，低龄或高龄孕妇以及性生活活跃的妇女中带菌率较高。并且推荐在怀孕三个月期间有任何菌尿的患者，羊膜破裂超过18小时，分娩温度超过38度的患者均需筛查GBS。关于GBS菌尿的抗生素治疗，临床医师必须采集尿液在实验室检测后进行抗生素治疗，且孕妇在孕期发生的有症状及无症状的菌尿均应按照标准的护理，治疗方案进行。